可溶性抗原的提純和純化是什么?
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1. 超速離心法:適用于少數(shù)大分子抗原或比重較輕的抗原,不適用于大多數(shù)中小分子抗原。
2. 選擇性沉淀法:
(1)核酸去除法:核糖核酸降解法更簡(jiǎn)便。
(2)鹽析法:常采用硫酸銨使蛋白抗原進(jìn)行粗篩、提取丙種球蛋白及抗原濃縮。
(3)有機(jī)溶劑沉淀法:常采用乙醇或丙酮。
(4)聚合物沉淀法:常用非離子型聚合物,如聚乙二醇(PEG)。
3. 凝膠過(guò)濾法:根據(jù)分子大小進(jìn)行分離純化。
4. 離子交換層析法:利用一些帶電離子基團(tuán)的凝膠或纖維素,吸附帶有相反電荷的蛋白質(zhì)抗原。
5. 親和層析法:與生物分子間不同的親和性進(jìn)行分離。如抗原和抗體、酶和酶抑制物、酶蛋白和輔酶、激素和受體等。
6. 電泳法:蛋白質(zhì)在同一pH環(huán)境中,分子量和電荷不同,在電場(chǎng)中遷移速率不同進(jìn)行分離。
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